分子克隆书籍的简单介绍

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如果条带是向上弯的月牙，可能是凝胶不均匀冷却，中间冷却不好，或电泳系统温度偏高。如果条带是向下弯的月牙，可能是由于装置不合适，特别可能是凝胶和玻璃挡板底部有气泡，或者两边聚合不完全引起的。

条带弱和整张膜发光原因是不同的。条带弱一般是因为表达量低，或者一抗的问题，比如质量不好或浓度太低或孵育时间太短。整张膜发光则是因为发光液的杂质含量太多，一抗洗涤不充分也可能导致整张膜发光。把一抗、洗涤和封闭的原因排除之后，仍然有整张膜发光，那就是发光液的质量问题。

得看你少的哪条带，一般来说最后一条带比较容易看不到，可能是由于你配胶的溶液放置时间长了浓度不够了，比如30%的丙烯酰胺。也可能是跑出去了或没跑完你就停了。

1、以“读者第一，服务至上”为宗旨，致力于不断提升信息服务水平。2007年在全国农林高校中第一个引进了SCI数据库，并成立了SCI服务中心，以便更好地开展基于SCI的个性化服务。采用借阅藏合一的借阅管理模式，周开馆时间近90小时。

2、你们知道吗？我的学校图书馆可是一个非常厉害的学习和研究资源中心哦！我们的馆藏资源非常丰富，包括纸质文献、电子文献、音像资料等，总藏量超过100万册。同时，图书馆还设有阅览室、自习区、多媒体教室等多个学习空间，可满足不同类型的读者需求。

3、截至2013年12月13日，收藏纸质图书138余万册，纸质期刊11万余册，电子图书235万册，数据库109个，电子期刊（全文）6万余种。

探索分子克隆的新领域：TOPO克隆技术详解拓扑异构酶（Topoisomerase）驱动的克隆技术，TOPO cloning，是一种独特的DNA克隆手段，无需依赖于限制酶和连接酶的常规操作。它巧妙地利用碱基配对原理，特别是A与T的互补，展现出了独特的克隆效率。

TOPO克隆使用了牛痘病毒中分离出的拓扑异构酶I，识别DNA序列5-(C/T)CCTT-3并在此序列上酶切双链DNA，暴露出T位点同时DNA断裂释放的能量储存在其 3胸腺嘧啶脱氧核苷的磷酸基团和拓扑异构酶I上的酪氨酸残基之间的共价键中。

因为用的是T7，所以不用担心PCR片段自连降低克隆效率，又因为是用的三类酶，可以通过黏性末端的设计，可以一种酶切多个片段，又不用担心这几个片段之间的乱连，来达到分子克隆的目的[5]。5， TOPO克隆(TA克隆)TOPO克隆使用DNA拓扑异构酶I，该酶同时具有限制酶和连接酶的特性。

【答案】：拓扑异构酶Ⅳ：拓扑异构酶Ⅳ为2个C亚基和2个E亚基组成的四聚体，在DNA复制后期姐妹染色体的分离过程中起重要作用。其中C亚基负责DNA断裂和重接；E亚基催化ATP水解和DNA前链的后移。

转录和修复过程中。DNA拓扑异构酶（topoisomerase）可在需要时引发开链构象，以允许DNA复制或转录发生。环状构象：除了超螺旋和开链外，质粒DNA还可以形成环状构象。这种构象通常涉及DNA链的连接，形成闭合环状结构。环状质粒通常较小且在某些实验室应用中很有用，例如在分子克隆和质粒传递中。

导读：无缝克隆技术是时下最流行的质粒构建技术，几乎每个分子生物学实验室都在使用。之前我给大家详细讲解了Gibson Assembly的实验设计和操作流程，那么这次给大家介绍另外一种无缝克隆方法——Golden Gate Assembly，希望能对大家的质粒构建实验有所帮助。

噬菌斑是噬菌体在固体培养基上溶解细菌产生的透明斑块，《基因工程》彭银祥老师的书籍第五章您可以查看一下，或者是《分子克隆实验指南第三版》，我手里有第四版但是没图片，谢谢。

噬菌斑名词解释如下：噬菌斑，即噬菌体侵染细菌细胞，导致宿主细胞溶解死亡，因而在琼脂培养基表面形成的肉眼可见的透明小圆斑，或称负菌落。

但上面一层比较薄，基本上就是噬菌斑大小的厚度，所以形成的噬菌斑不会有层次和重叠。即使有层次和重叠，也远不如厚培养基中那么明显。如下图中右边两图。这样就使得观察物在同一平面，更利于噬菌斑的观察及分离纯化。

由噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”叫噬菌斑，空斑与动物病毒有关。噬菌斑与噬菌体有关系，由噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”叫噬菌斑；由动物病毒在宿主单层细胞培养物上形成的叫空斑。

当把细菌涂布在培养基上，长成一层菌苔时，一个噬菌体感染其中一个细菌时，便会同上面所说的那样，把该细菌周围的成千上万个细菌感染致死，在培养基的菌苔上出现一个由于细菌被噬菌体裂解后造成的空斑，这便称为噬菌斑(plaque)。

分裂时。溶原性菌株带有温和噬菌体的菌株称为溶原性菌株，温和噬菌体整合到细菌的染色体上会随着细菌染色体复制产生溶原性菌株，根据查询溶原性菌株的信息简介可知，该菌株在分裂时候会出现噬菌斑。

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